微生物实验之“芽管试验"
发布时间:2025-02-24 浏览次数:127
芽管试验(Germ tube test)是一种用于快速鉴定白色念珠菌(Candida albicans)的常用方法。 该试验通过观察酵母细胞在特定条件下是否能够形成芽管来区分白色念珠菌和其他酵母菌。
原理与方法
芽管试验的基本原理是白色念珠菌在含有营养成分的液体培养基中,特别是在37°C下培养2-4小时后,能够形成芽管。 芽管是一种短小、无隔膜的发芽酵母丝,其宽度约为原细胞宽度的一半,长度是原细胞长度的三到四倍。
操作步骤
1、材料准备:取0.5-1.0 mL人或动物血清,加入到接种环中。
2、培养条件:将接种环轻轻触碰待测菌落,然后将血清滴入培养皿中,置于35-37°C的恒温箱中培养3小时。
3、显微镜观察:培养后,取一滴培养液涂片,覆盖一层薄薄的玻璃片,在低倍镜下观察芽管的存在或缺失。 若在高倍镜下确认芽管,则可判定为白色念珠菌。
敏感性和特异性
芽管试验的敏感性和特异性通常较高。 研究表明,使用人血清进行芽管试验时,敏感性可达98%-100%,特异性也接近100%。 然而,需要注意的是,热带念珠菌(Candida tropicalis)有时也会产生假阳性结果。 血琼脂培养基(BHI)也是一种有效的诱导剂,其敏感性和特异性分别为96%和97%。胰蛋白胨水的敏感性和特异性较低,分别为85%和67%。穆勒-亨利培养基(MH)的敏感性和特异性较高,分别为93%和92%。
影响因素
1、温度:最佳温度为37°C。
2、培养基:不同的培养基对芽管形成的影响不同。 例如,人血清和BHI(Brain Heart Infusion)培养基是较好的诱导剂。
3、培养时间:培养时间过长可能导致非白念珠菌菌株误判为阳性。
4、接种量:接种量不足可能影响芽管的形成。
局限性
芽管试验广泛应用于临床实验室中,用于快速鉴定白色念珠菌。 然而,该方法也存在一些局限性:
1、热带念珠菌有时也会产生芽管导致假阳性产生;
2、某些白念珠菌菌株可能不形成芽管;
3、新鲜血清或冷冻血清均可用于芽管试验,但冷冻血清可能会影响结果;
4、使用人血清时需注意可能携带的病毒(如HIV、乙型肝炎病毒等),因此建议使用非人血清基质作为替代;
5、环境条件(如温度、湿度)可能影响芽管的形成。
芽管试验是一种简单、快速且可靠的初步鉴定白色念珠菌的方法。 尽管存在一定的局限性,但通过优化实验条件和选择合适的诱导剂,可以显著提高试验的准确性和可靠性。
文章来源:环凯转载于“ 检验世界”公众号;原标题:“微生物实验之“芽管试验"”;作者~脚丫。
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